高压氧所致大鼠脂质过氧化作用及两种中药复方保护作用的研究

中山医科大学附属第一医院刘子藩  何伟增  潘小冰

                                 沈剑刚   

摘要    本文为两组试验的研究结果,报告了不同的压力、时间,纯氧及空气吸入对脂质过氧化反应强度的影响以及高氧灵、益气通络丹、SODEbselenDMSO的抗氧化保护作用,试验均用SD健康雄性大鼠,随机分组,结果表明:

      高压氧条件下脂质过氧化反应水平与压力、时间的变化成正比,纯氧吸入脂质过氧化水平为高;0.2mPa条件下纯氧吸入120分钟的时间可造成大鼠机体LPO含量显著增加,SOD含量显著减少,脂质过氧化反应水平显著增高,易产生氧中毒;而60分钟的治疗时间虽然LPO水平增高,但SOD含量也增高,说明机体具有抗氧化能力;高压氧下脑组织脂质过氧化水平比心肌高;高氧灵、益气通络丹、SOD能拮抗或抑制高压氧所致脂质过氧化作用。EbselenDMSO也有一定的抗氧化作用。

    关键词    高压氧    脂质过氧化    SOD    抗氧化能力

高压氧治疗是使用一种既没有侵害性又没有毒素的使人体加强抵抗疾病的能力和消除病痛的方法。然而在临床应用中,可能产生的副作用一氧中毒,值得重视。

    高压氧所致氧中毒发病机理尚未完全阐明,目前主要从以下三方面进行了研究(l)对脑代谢的毒性作用;(2)对酶的抑制作用;(3)毒性过氧化脂质的形成,即称“自由基机制”。其中自由基及其所致脂质过氧化作用(LP)是重要的环节,对前两方面也有影响。在正常情况下,机体固有的抗氧化体系能消除自由基,只有在自由基超过机体抗氧化能力时才会造成脂质过氧化损伤。本文系统观察了不同压力、时间条件下血液、心脑组织LP反应强度,可以从LP角度探讨最适合临床治疗压力与时间。

    抗氧中毒的方法可以两种:(1)调动疗法,调动机体内在抗氧化能力。(2)补充疗法,即用外源性被动补充抗氧化剂。目前已有报道许多中药具有提高机体超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶活力的作用,同时许多中药所含黄酮类、茶多酚类等化合物具有直接清除自由基作用,植物本身也含SODCAT等抗氧化酶,中药对机体各系统有广泛调节作用;因此,中药既有调动疗法的作用又有补充疗法的功效;可以作为抗氧毒性的药物。故本研究重点观察了益气活血名方“补阳还五汤”衍生方的抗HBO LP作用。

第一部分  不同压力、时间纯氧及空气吸入对脂质过氧化反应强度纯影响

材料与方法

      一、实验动物及分组

      SpragueDawley系健康雄性大鼠(第一军医大学实验动物中心、中山医科大学实验动物中心、肿瘤医院提供),体重315450克。完全随机分组。

    10.25Mpa、纯氧吸入30min实验组,15只。

      20.25Mpa、空气吸入30min实验组,10只.

      30.20Mpa、纯氧吸入30min实验组,10只。

      40.20MPa、空气吸入30min实验组,10只。

      50.20Mpa、纯氧吸入60min实验组,10只。

      60.20Mpa、空气吸入60min实验组,10

      70.20Mpa、纯氧吸入120min实验组,10只。

      80.20Mpa、空气吸入120min实验组,10只。

      90.20Mpa、纯氧吸入240min实验组,10只。

      100.20Mpa、空气吸入240min实验组,10只。

      110.20Mpa、正常对照组,10只。

      二、实验方法

      先模型制作及取材、后制备样品:

      实验组大鼠于实验前四小时禁食。但不禁水,实验时将动物分别放入连接输氧管的容积约40升的硬质塑料容器之中,容器留一气孔与外界相通,置于高压舱内加压,纯氧组开启输氧管道给予浓度为100%的纯氧,流量10升/分;空气组在舱内呼吸空气。各实验组按所定压力、时间给氧或空气,终止吸氧减压,0.25Mpa压力组减压60min取出,0.20Mpa压力组减压30min取出,对照组大鼠在舱外环境正常压力条件下呼吸空气。所有动物于实验完毕后立即取左侧颈总动脉血液、心尖部组织及左侧大脑额叶组织。

      三、检测指标及方法

      (一)血浆脂质过氧化物(LPO)含量的测定

      采用齐氏等介绍的改良八木国夫法测定血浆LPO含量。

      (二)组织脂质过氧化物(LPO)含量测定

      参照Ohkawa TBA反应显色法测定。

      (三)红细胞、组织超氧化物歧化酶(SOD)含量的测定。

     四、结果可信性

      所有结果符合生化检测标准。

      五、统计学处理

      多组比较采用单因素方差分析。


 


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