不同压力的高压氧对家兔自由基的影响
首都有医学院附属北京红十字朝阳医院* 高压氧科 高春锦 杨捷云
葛环
实验中心 张菁 林雪芹
郑州市第二人民医院** 高压氧科 毛云鹏
*邮政编码100020 **邮政编码450000
摘要
关于高压氧对机体自由基的影响，国内外文献不多，而且结论又相互矛盾。为此我们使用纯种日本大耳白兔，分别在0.2Mpa、0.3Mpa、0.4Mpa压力下呼吸纯氧（浓度为99.9%），每日一次，连续十次。结果发现0.2~0.4Mpa压力下，血浆总SOD、MnSOD增主，CuZnSOD减少；红细胞SOD增加更显著；谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和过氧化氢酶（CAT）早期增高，后下降并波动于对照值上下，且无显著性差异；丙二醛（MDA）无明显增加。说明常规高压氧（0.2~0.25Mpa）治疗，连续十次，不会引起机体内自由基增多和脂质过氧化反应增强。
关键词 高压氧（HBO） 自由基（FR） 超氧化物阴离子自由基（Superoxide anion ridical O-2） 超氧化物歧化酶（SOD） 过氧化氢酶（CAT） 脂质过氧化物（LPO）
材料与方法
一、实验对象
纯种成年日本大耳白兔，雌性，体重2500-3000克。产地：军事医学科学院实验动物中心。、合格证号：京动字8910R601。
二、实验编组
实验白兔共15只，随机分成甲、乙、丙三组，每组5只。
三、实验安排
1、高压舱及压力：本试验采用大型高压空气舱群（三舱七门）。三个舱分别充0.2Mpa（2ATA）、0.3Mpa（3ATA）、0.4Mpa（4ATA）的高压空气。三舱同时启动，加压30分钟、稳压60分钟、减压60分钟。
2、给氧方法：在高压舱内，将白兔置于有进出气孔的密闭木箱内（进出气孔分别在木箱的两侧），进气孔连接氧气管道。供氧浓度为99.9%。呼出气从气孔直接排入舱内。
3、高压氧按排：甲、乙、丙三组白兔分别置于0.2、0.3、0.4Mpa舱内。稳定期间吸纯氧60分钟，每日进舱吸氧一次，共10次。
4、标本采集：各组白兔
（1）在进行HBO前全部采血（作为对照）；
（2）在第1、2、4、6、8、10次HBO出舱后即采血；
（3）终止HBO后第7天（10-7）采血。每只白兔共采血8次。
抗凝试管：予先加入定量肝素溶液，自然干燥后备用。从白兔耳缘静脉抽血2.5ml，迅速注入抗凝管内，摇匀，无凝血，立即送检。
四、检测项目
血浆SOD（包括总SOD、MnSOD、CuZnSOD）；红细胞SOD；GSH-PX；CAT；MDA。
五、实验条件及方法
1、室温：22±1℃。
2、仪器：岛津CL-750半自动生化分析仪（日产）
岛津UV-240分光光度计（日产）。
37℃电热衡水浴箱（北京产）。
3、实验方法：SOD：亚硝酸盐法、GSH-PX：比色法、CAT：紫外分光比色法、MDA：TBA法。
六、统计学检验：采用t测验
实验结果
每组白兔HBO前各酶之均值，（作为该组之对照值）与其他各次均值比较以及统计学检验结果，见表（1）、（2）、（3）。各组酶的动态变化，见图（1）——（7）。
表1 甲组（0.2Mpa）白兔HBO前后各项检验均值比较表
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血浆(nu/ml)
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RBC-SOD
(nu/g.Hb)
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GSH-PX
(u/g.Hb)
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CAT
(k/g.Hb)
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MDA
(nmol/ml)
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总SOD
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MnSOD
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CuZnSOD
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对照值
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350.23±86.75
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39.73±20.46
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310.50±75.99
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919.78±118.41
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167.72±20.54
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123.20±14.28
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1.170±0.277
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HBO前
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HBO1
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384.31±43.12
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75.11±22.14*
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309.20±50.81
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1112.98±61.49*
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242.83±22.57**
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150.51±30.83
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0.996±0.315
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HBO2
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399.45±42.76
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126.52±51.50**
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272.98±57.161
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1149.86±121.11*
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146.09±23.27
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139.24±13.68
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1.122±0.706
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HBO4
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374.33±59.65
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49.44±8.65
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325.00±65.04
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963.35±52.99
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139.79±37.82
|
145.49±13.18*
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1.591±0.452
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HBO6
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367.86±66.46
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99.74±55.37*
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268.12±65.69
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1098.34±51.29*
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166.28±26.23
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158.61±31.20*
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1.156±0.304
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HBO8
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345.65±77.88
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90.84±42.94*
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254.81±50.97
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1075.64±186.74*
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180.66±22.61
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137.35±38.67
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0.833±0.268
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HBO10
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308.17±68.96
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51.69±45.61
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256.48±55.61
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1070.05±89.21*
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164.77±27.91
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155.25±20.88*
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1.431±0.212
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终止HBO后
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303.34±50.90
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58.9±49.7
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244.4±53.06
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924.68±116.8
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179.14±28.86
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139.5±46.2
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1.345±0.146
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后7天
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