高压氧对大鼠局灶性脑缺血作用的观察

河北省医学科学院*病理生理研究室  闵宝珍  场吉方  张北奇

     病理研究室  吴淑敏

 河北省第四医院  杨宗德

    摘要  用血栓塞性脑缺血动物模型,多次暴露在高压氧环境中,观察到脑梗塞体积明显缩小,血浆中丙二醛(MDA)含量下降,红细胞内超氧化歧化酶(SOD)活力未见抑制的趋势,动物死亡率明显降低。

    关键词  高压氧  脑梗塞  丙二醛  超氧化歧化酶

    高压氧(HBO)用于治疗脑血管疾病以其增加氧分压,提高血氧弥散率,从而改善和纠正缺氧组组的损伤[1]。然而近年研究发现机体暴露于HBO环境能增加氧自由基的产生[2],因此,HBO疗法是否增加氧自由基产生造成缺氧组织继续损伤,有关这方面的研究迄今未见报导。我们用血栓栓塞性脑缺血模型.多次暴露在HBO环境中,观察其血浆中MDA、红细胞中 S 道,脑梗塞体积以及死亡率的变化。本研究旨在为HBO疗法安全性提供科学依据。

材料和方法

    实验选用本院繁殖的Wistar大鼠34只,水含氯醛(35mg/100g)腹腔麻醉,颈中切开分离左侧颈内及顿外动脉,电凝颈内动脉颅外分支,从颈外动脉逆行插入一导管,经波导管徐徐注入同种属血凝块造成大脑中动脉局灶性缺血模型[3]。将模型随机分成两组,HBO组和缺血组。HBO组:动物术后10小时.暴露于HBO环境中(氧压为0.25MPa,氧浓度为95%)  2小时,于次日上、下午各再次暴露2小时,第三日上、下午重复暴露2小时,总共暴露5次,每次2小时。第四日上午(即术后72小时)用水含氯醛麻醉,从腹主动脉抽血测定MDA及S OD,然后断头剥出大脑,将大脑组织放在冰冻切片机上迅速冷冻,然后将大脑组织放在平器上,用自制10片刀,每片间隔2mm一次切下,每个大脑切成8~9张切片,立刻用硝基四氮唑兰染色约10分钟(37℃),正常脑组织为紫兰色。缺血区不着色,彩色反转片拍照成幻灯片。缺血组:缺血动物术后喂养72小时处死,实验方法同上。

指标测定方法

    1.图象分析处理:将拍照成的幻灯片,用英国剑桥QTM-970型图象分析仪进行处理,测定每只大鼠全脑体积,脑梗塞灶体积及其百分比。脑组织常规石蜡切片。HE染色,光镜检查确定而无梗塞。

    2.血浆中MDA测定:根据脂质过氧化物最终分解为MDA的原理,分别取两组动物的血浆测定MDA的含量,按齐氏报导的改良八木国夫法[4],在59-WC型分光光度计上进行。结果以nmol/ml表示。

    3.红细胞中SOD活力的测定:将两组动物的红细胞分别测定SOD活力,用邻苯三酚自氧化法[5],在59-WC型分光光度计上进行,以U/gHb表示。

    4.死亡率计算标准:两组动物均以术后12小时后死亡数计算(即第一次HBO暴露后死亡数)。

 
 


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