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一氧化碳中毒大鼠高压氧治疗后体内自由基效应的动态观察
北京军区总医院*
周
伟 陈 国 李亚平 候艳丽 黄克显
刘家文 孟昭如
北京红十字朝阳医院*
高春锦
杨捷云
摘要:为动态了解一氧化碳中毒大鼠体内自由基在高压氧环境下的变化,用顺磁共振波谱仪测定了经高压氧治疗一氧化碳中毒大鼠及对照组的心、肝、脑中自由基相对含量。实验结果发现对照组2—3天时出现电子自由基振波值高峰,而高压氧治疗组电子自旋共振波值高峰提前l-2天。约7天后出现第二个高峰,但峰值明显降低。结果提示:一氧化碳中毒后所产生的自由基是受损细胞在恢复过程中的必然产物。过剩的自由基可刺激机体产生较多的自由基清除剂。在高压氧治疗过程中自由基不足以达到损伤机体的浓度而有利于组织的恢复。
关键词:氧自由基 顺磁共振波谱技术
高压氧 一氧化碳中毒
近年来,由于自由基在生物体系中的作用成为医学家颇感兴趣的研究课题,因此几乎所有的生命现象以及疾病都从自由基的作用方面进行着研究。自高压氧(HBO)治疗方法问世以来,HBO对急性一氧化碳中毒(ACOP)患者是最佳的原因疗法,故就大鼠CO中毒模型进行HBO实验,探讨组织缺氧所致的损伤以及在HBO治疗过程中氧自由基(OFR)对机体的动态效应。
材料和方法
一、检测材料:
(1)CO气。纯度 99.99%。北京分析仪器厂提供。
(2)快速检测管。北京朝阳区北苑检测分析仪器厂提供。
二、实验对象:中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供,品系一级标准,医动字第O1一3039号。Wistar大白鼠,雌雄各半,体重 200g/只左右,共9O只。动物随机分组,设对照组,每组六只。
三、染毒方法:0.5立方米密闭染毒柜内,静式吸入CO气,持续45分钟。以快速检测管采样5OML进行柜内CO浓度检测,染毒过程中共测三次,柜内浓度维待在35O0—4O00/M3。
四、HBO治疗方法:采用中国船舶工业总公司第七○一研究所生产的
YLC0.5-1型纯氧舱,升减压各15分钟,稳压30分钟,压力O.2MPa,洗舱三次,用CY—12C型测氧仪测得氧浓度在72-82%之间。舱内湿度15-19℃。
动物治疗时相见表1。
表1动物治疗时相(n=6)
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组 别
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时
相
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单纯染毒
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3h(1)
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8h(2)
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1D(3)
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2D(4)
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3D(6)
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7D(15)
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10D(21)
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HBO治疗
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3h(1)
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8h(2)
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1D(3)
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2D(4)
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3D(6)
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7D(15)
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10D(21)
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括号内为HBO治疗累计次数
五、血碳氧血红蛋白测定方法:为CO血红蛋白(Hb)定性实验。
六、标本采集:断头处死动物,立即解剖取出组织,放入蜡管中,投入液氧,待测OFR。剖取组织顺序为:脑、肝、心。
七、电子顺磁共振技术(ESR)检测:使用BRUKER-ESR300型顺磁共振波谱仪。
ESR信号为组织中OFR相对含量。X波段,微波功率5mw。高频调制25KHZ,调制幅度2G,测量温度77K,扫描时间3mln,时间常数4O。
结
果
一、大鼠CO中毒临床症状:染毒伊始,动物表现活跃。5-6分钟后开始燥动,8分钟时四肢瘫软,呼吸急促,即而出现陈氏呼吸。在染毒过程中共有 43只大鼠昏迷,占
47.7%。复苏后在饲养过程中,初期表现为精神萎糜,1-3小时后与对照组及未昏迷鼠外观上无明显区别。
二、血碳氧血红蛋白测定:染毒后碳氧血红蛋白呈阳性反应,正常对照组为阴性。
  
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