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高压氧对缺血再灌注脑组织超微结构影响的实验研究
首都医科大学附属北京红十字朝阳医院*
高春锦
葛
环
杨捷云
曲铁兵
曹大德
厦成青
北京公安医院**
王莉
北京医科大学***
安林
摘要
本题以大白鼠为对象，制成脑缺血再灌注模型。观察高压氧不同治疗时限对其脑组织超微结构的影响，通过与对照组的比较及临床分析，发现高压氧可以降低缺血再灌注对神经元和胶质细胞的损伤，提出临床高压氧治疗缺血性脑血管疾病的亚细胞形态学依据及有效治疗方案。
关键词
高压氧缺血再灌注脑组织超微结构
高压氧对缺血性脑血管病的治疗作用已得到临床实践的肯定[1]。但高压氧对缺血再灌注后神经元超微结构的影响国内仅见2例报告，且结论又相距甚远[2，3]。至今未见高压氧对该病脑组织亚细胞结构的系统研究。本实验采用临床治疗缺血性脑血管病病人的压力、时限、疗程地研究高压氧对缺血再灌注损伤神经元、胶质细胞超微结构的影响，以探讨高压氧对缺血再灌注脑组织的保护作用。
材料与方法
1．实验对象：健康成年WISTER大鼠。北京医科大学动物室提供，合格证号：医动字—3056。体重200—250g，雌雄不限，共100只。
2．模型制备：采用PULSINELLI四动脉闭塞法[4]。以戊巴比妥纳（45mg/kg）腹腔麻醉，自颈部切开暴露并游离双侧颈动脉，置丝线待用。然后作项背正中切口，分离椎旁肌暴露第1颈椎翼状孔，用电烧针电凝其下的椎动脉。24小时后以待用丝线结扎双颈动脉，阻断血流20分钟后剪断丝线，制成脑缺血——再灌注动物模型。模型成功的标准是翻正反射消失。
3．实验分组：将100只模型鼠随机分成A组（高压氧组）和B组（对照组），每组各50只。A组术后当日起每日进高压氧舱治疗1次，持续到检测时。B组与A组在同等条件下饲养，但不作任何处理。
4．高压氧条件：将动物置入特制木箱中，箱下方设供氧管入口，箱项设出气口。采用直排式给氧，给氧2分钟后在出气口测排出气体氧浓度为98.8%将木箱置于舱内，舱内温度24±2℃，升压30min，升压至0.2Mpa时稳压，持续给氧60min，减压40min，每日1次。
5．分期检测与方法：高压氧治疗第一日后，将两组模型鼠随机按术后第1天、第3天、第7天、第14天、第21天分五期，每期10只鼠。将受检鼠断头处死，取额颞叶皮质，用2.5%戊二醛固定，常规制成超薄切片，电镜下观察。临床观察翻正反射、步态状态。
6．电镜条件：日本产H500型号电镜，观察时放大倍数7200—20，000倍。观察项目：额颞叶皮质神经元、胶质细胞超微结构。每个标本观察50个细胞。
  
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