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·论著·
高压氧对高脂血症与动脉粥样硬化影响的实验研究
河北医科大学第四临床学院* 杨 硕 刘风玲 李桂玲 段云亭 刘清义
河北医科大学病理教研室*
焦炳忠 王 刚 吴建梁
河北省儿童医院 董风岐 李贵霞 闰保丽
摘要：本实验以日本大耳白兔为对象，制成高脂血症（HL）与动脉粥样硬化（AS）模型，用高压氧（HBO）进行干预，观察HBO对HL与AS的影响，以证明其有无防治效应。实验组动物经30～90次HBO后，血脂明显降低，血清SOD升高，心血管的AS病变减轻，主动脉内膜上脂质沉积班数量减少，面积缩小，病变血管阻塞程度减轻，与对照组相比，有显著或非常显著差异，实验结果提示HBO对实验性HL与AS有一定预防与治疗作用。
关键词：高压氧 高脂血症 动脉粥样硬化
近年来高压氧（Hyperbaric oxygen HBO）广泛应用于临床，对多种老年性疾病（如动脉硬化症、老年性痴呆、脑梗塞、冠心病等）显示有良好的疗效，但文献中缺少生化与病理的实验研究[1，2]。高脂血症（High
Lipoidemia HL）及动脉粥样硬化（Afhrosc lerosis AS）是上述老性病的重要病因与病理基础，为观察HBO对它们的影响，我们以免为实验动物，制成HL与AS病理模型，用HBO进行干预，然后测定实验动物血脂与超氧化物歧化酶（SOD），观察其在HBO前后的变化，以判定HBO对HL的影响，同时对实验动物进行病理检查，以了解HBO对主动脉与心脏血管上AS病变的作用，本实验目的企求从生化与病理形态学方面证明HBO有无降低HL及防治AS的作用。现将实验结果报告如下。
实验方法
1． 实验动物与分组：选用华北制药厂实验动物中心提供的日本大耳白兔30只（合格号HZC一0294910），每兔体重3.0～3.5KG，年龄6～9个月，用统一配制标准饲料（玉米面加蔬菜）室内单笼喂养，经检疫两周证明无病。30只兔随机分为3组并分别标号，第一组（标号S组）6只，用标准饲料喂养；第2组（标号P组）12只，为造型十HBO预防，其中6只为实验组（P1组），另6只为对照组（P2组）；第3组（标号T组）12只，在造型后再用
HBO治疗，其中6只为实验组（T1组），另6只为对照（T2组）。
2．造型：除S组外，P与T组均进行造型喂养，参照李子行等的造型方法[3]，在标准饲料中加入造型剂结晶胆固醇（荷兰制造、河北医科院试剂室提供）、纯蛋黄粉与猪油，剂量为每兔每日食入胆固醇
0.4g，蛋黄粉与猪油各2.0g，连续造型3个月，使实验动物发生HL与AS病变。
3．HBO治疗:P1组从服造型剂开始，同时应用HBO（采用单人高压氧舱，压力2ATA，氧浓度90％，稳压后吸氧60min，舱内总停留时间90min，每天治疗1次，每周6次），共90次。T1组先服造型剂3个月，然后再用HBO治疗30次（方法同上）、
S组、P2与T2组做为对照，均不用HBO。
4．观测指标：（l）血液老化检查：每兔于造型前、造型后、HBO后及处死前抽取耳血3ml，用瑞士Cobas
Fara离心式全自动生化分析仪进行检验，检测项目为游离胆固醇（FC）、三油甘酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白A（HDL）、载脂蛋白B（aPoB）及血清SOD。
（2）病理检查：实验结束后3天，用气栓法处死动物，开胸取出整条胸主动脉与心脏，将胸主动脉纵行切开，展平固定于腊盘内，用10％福尔马林液固定，对主动脉内膜上的脂质沉积斑作肉眼观察与放大镜检查（从主动脉瓣环至最后一对肋间动脉开口部为止），记录所见斑点与斑块数量。并拍照成黑白相片，放大4倍后用方格纸描写与测量每一斑块面积。心脏剥除外膜经福尔马林固定后，作定位横贯左、右心室取材，常规石腊制片，在显微镜下观察心肌中的大、中、小血管，记录血管总数与病变血管数，用四级积分法计算病变血管管腔阻塞程度（1级管腔阻塞＜25％，积1分，2级阻塞
26～50％，积2分，3级阻塞51～75％，积3分。4组阻塞＞76%，积4分＝。
5．数据处理：对每只实验动物检测结果详细计数，算出每组的平均值与标准差，对所获数据进行七检验。
实验结果
1．血脂
S组动物实验前与饲养3个月后的血脂变化不明显。P组与T组动物造型3个月后血脂明显升高，与造型前相比有非常显著差异。（表1）
表1各组动物实验造型前后的血脂变化（X士S）△
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组别
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检测时间
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FC
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TG
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TC
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HDL
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LDL
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apoA
|
apoB
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S组（N=6）
|
实验前
|
0.26±0.03
|
0.78±0.14
|
1.12±0.19
|
0.17±0.01
|
0.45±0.17
|
0.05±0.01
|
0.15±0.04
|
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3个月后
|
0.23±0.02
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0.90±0.17
|
1.33±0.21
|
0.15±0.01
|
1.10±0.32
|
0.05±0.01
|
0.15±0.03
|
|
P值
|
＞0.05
|
＞0.05
|
＞0.05
|
＞0.05
|
＜0.01
|
＞0.05
|
＞0.05
|
|
P组（N=6）
|
造型前
|
0.25±0.03
|
0.83±0.16
|
0.90±0.10
|
0.12±0.01
|
0.56±0.09
|
0.05±0.10
|
0.15±0.04
|
|
造型后
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4.24±0.41
|
2.23±0.21
|
10.38±0.99
|
0.41±0.03
|
9.52±0.56
|
0.15±0.01
|
1.08±0.08
|
|
P值
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＜0.01
|
＜0.01
|
＜0.01
|
＜0.01
|
＜0.01
|
＜0.01
|
＜0.01
|
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T组（N=6）
|
造型前
|
0.26±0.03
|
0.75±0.11
|
0.94±0.16
|
0.15±0.01
|
0.74±0.12
|
0.06±0.01
|
0.18±0.06
|
|
造型后
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2.59±0.39
|
1.23±0.22
|
9.26±0.37
|
0.47±0.02
|
8.60±0.36
|
0.14±0.01
|
0.54±0.02
|
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P值
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＜0.01
|
＜0.01
|
＜0.01
|
＜0.01
|
＜0.01
|
＜0.01
|
＜0.01
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△ 血脂计量单位：FC、TG、TC、HDL、LDL为mmol/L
apoA、apoB为g/L
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